Den bakterielle endotoksintesten (BET) utføres i de fleste moderne laboratorier under kontrollerte forhold som den viktige faktoren for å unngå interferens.
Passendeaseptisk teknikker viktig ved utarbeidelse og fortynning av standarder og håndtering av prøver.Kjolepraksis utenfor vanlig laboratorie personlig verneutstyr (PPE) krav er ikke et problem med mindre produktet som testes krever spesifikke sikkerhetshensyn fra analytikere på grunn av toksisitet eller smittsomhet.Hanskerbør være TALC-fri, da TALC kan inneholde betydelige nivåer av endotoksiner.Tallerkenlesere, vannbad og tørre varmeblokkerbrukt til prøveinkubering bør være på en laboratoriebenk unna varme-, ventilasjons- og luftkondisjoneringskanaler (HVAC), betydelige vibrasjoner og laboratorietrafikk som kan påvirke testresultatene.Prøveholdetider og -betingelserbør bestemmes og deretter dokumenteres, om nødvendig, for å sikre at nøyaktige testresultater kan genereres innen kvalifisert tid.
For eksempel, hvis laboratoriet mottar en vann til injeksjon (WFI) eller i prosessprøve, må den avkjøles eller kan den stå i romtemperatur, og hvor lenge?Før testing anbefales det at primærprøvebeholderen(e) blandes tilstrekkelig før prøveportionen(e) fjernes for enten direkte testing eller etterfølgende fortynning.
Bioendo bakteriell endotoksintest, eksperimentene er inkludertgelpropp metodeendotoksin testanalyse ogkvantitativ endotoksintestanalyse, gel clot-metoden endotoksintestanalyse er kvalitativ endotoksindeteksjon, disse eksperimentene krever at forbruksmateriellet er depyrogeneringsbehandling, for eksempel endotoksinfri reaksjonsrør, fortynningsrør og pyrogenfrie tips;kvantitativ endotoksindeteksjon har kinetisk kromogen endotoksintest, kinetisk turbidimetrisk endotoksintest, disse eksperimentene krever at forbruksvarer må møte toppnivået av endotoksiner mindre enn0,005 EU/ml( 0,001EU/ml ), slik som endotoksinfrie rør, pyrogenfrie spisser og pyrogenfrie mikroplater, til og med pyrogenfri resevoir.Forresten, hvis prøvene behandles, må beholderen være en endotoksinfri prøveflaske.
Ved endotoksintesting kan interferens oppstå fra en rekke kilder, for eksempel prøvematrisekomponenter, testreagenser eller utstyr.
For å unngå eksperimentinterferens kan følgende tiltak tas:
1. Prøveforberedelse: Riktig prøveforberedelse er avgjørende for nøyaktig endotoksintesting.
Prøvematrisen bør testes grundig og optimaliseres for å sikre kompatibilitet med endotoksinanalysen.
Spesielt bør forstyrrende stoffer som lipider og proteiner fjernes eller minimeres ved bruk av passende teknikker som filtrering eller sentrifugering.
2. Positive og negative kontroller: Det er viktig å inkludere positive og negative kontroller i analysen for å overvåke for interferens.
Positive kontroller bekrefter funksjonaliteten til testen, mens negative kontroller oppdager enhver forurensning eller interferens fra analysekomponentene.
3. Kvalitetskontroll: Kvalitetskontroll bør utføres på alle reagenser, utstyr og vann som brukes i analysen.
Dette sikrer at reagensene er fri for endotoksinforurensning og fungerer som de skal.
4. Standardisering: Analysen bør standardiseres for å sikre at alle resultater er sammenlignbare og reproduserbare.
Dette innebærer bruk av en standardkurve for å kalibrere analysen og bruk av standardiserte teknikker for prøvepreparering, inkubering og deteksjon.
5. Validering: Analysen bør valideres for å sikre at den er spesifikk, sensitiv og pålitelig.
Dette innebærer å teste en rekke prøver, inkludert de som er kjent for å inneholde endotoksin, for å bestemme nøyaktigheten og presisjonen til analysen.
Ved å følge disse tiltakene kan interferens minimeres, og nøyaktig endotoksintesting kan oppnås.
Innleggstid: Des-01-2022
