Hva er endotoksintest?

Hva er endotoksintest?

Endotoksiner er hydrofobe molekyler som er en del av lipopolysakkaridkomplekset som danner det meste av den ytre membranen til gramnegative bakterier.De frigjøres når bakteriene dør og deres ytre membraner går i oppløsning.Endotoksiner anses som de viktigste bidragsyterne til den pyrogene responsen.Og parenterale produkter forurenset med pyrogener kan føre til utvikling av feber, induksjon av inflammatorisk respons, sjokk, organsvikt og død hos mennesker.

Endotoksintest er testen for å oppdage eller kvantifisere endotoksiner fra gramnegative bakterier.

Kaniner brukes til å oppdage og kvantifisere endotoksiner i farmasøytiske produkter først.I følge USP innebærer RPT overvåking for økning i temperatur eller feber etter intravenøs injeksjon av legemidlet i kaniner.Og 21 CFR 610.13(b) krever en kaninpyrogentest for spesifiserte biologiske produkter.

På 1960-tallet fant Fredrick Bang og Jack Levin at amebocytter fra hesteskokrabben vil koagulere i nærvær av endotoksiner.DeLimulus Amebocyte Lysate(eller Tachypleus Amebocyte Lysate) ble utviklet tilsvarende for å erstatte de fleste RPT.På USP omtales LAL-testen som bakteriell endotoksintest (BET).Og BET kan gjøres ved å bruke 3 teknikker: 1) gel-clot-teknikken;2) den turbidimetriske teknikken;3) den kromogene teknikken.Krav til LAL-testen inneholder optimal pH, ionestyrke, temperatur og inkubasjonstid.

Sammenlignet med RPT er BET rask og effektiv.BET kunne imidlertid ikke erstatte RPT fullstendig.Fordi LAL-analysen kan bli forstyrret av faktorer og den ikke er i stand til å oppdage ikke-endotoksinpyrogener.