Anvendelse av kromogen teknikk på bakteriell endotoksintest

Kromogene teknikk er blant de tre teknikkene som også inneholder gel-koagelteknikk og turbidimetrisk teknikk for å oppdage eller kvantifisere endotoksiner fra gramnegative bakterier ved å bruke amøbocyttlysat ekstrahert fra det blå blodet fra hesteskokrabbe (Limulus polyphemus eller Tachypleus tridentatus).Den kan klassifiseres som en endepunkt-kromogen analyse eller en kinetisk-kromogen analyse basert på det bestemte analyseprinsippet som brukes.

Reaksjonsprinsippet er at: amebocyttlysatet inneholder en kaskade av serinproteaseenzymer (proenzymer) som kan aktiveres av bakterielle endotoksiner.Endotoksiner aktiverer proenzymene for å produsere aktiverte enzymer (kalt koagulase), sistnevnte katalyserer delingen av det fargeløse substratet, og frigjør et gulfarget produkt pNA.Det frigjorte pNA kan måles fotometrisk ved 405 nm.Og absorbansen er positivt korrelert med endotoksinkonsentrasjonen, så kan endotoksinkonsentrasjonen kvantifiseres tilsvarende.


Innleggstid: 29. september 2019